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Enterobacter cloacae, Escherichia coli 1 et 2, Serratia ...

Avec la Galerie API 20E de BioMérieux (*)

Date de la dernière modification
: 25-04-2017

A - MATÉRIEL 

* Galerie API 20 E (réf. 20 100) + boîte + couvercle, tableau de détermination.

* Bec Bunsen, galerie avec un tube à vis stérile, marker, pipettes Pasteur, pipeteur, une pipette graduée 0 à 10 ml, huile de paraffine, eau distillée stérile (ou « Suspension Medium » 5 mL - Réf. bioMérieux 20 110).

ATTENTION : il faut préalablement avoir développé une bactérie en colonies isolées dans une boîte de Pétri.

B - PRÉPARATION DE LA GALERIE API

* Réunir fond et couvercle d’une boîte d’incubation et répartir environ 5 mL d’eau dans les alvéoles (avec pipette graduée et pipeteur) pour créer une atmosphère humide.

* Inscrire les références de la souche bactérienne sur la languette latérale de la boîte (+ date et initiales de l’opérateur).

* Déposer la galerie dans la boîte d’incubation.

C - PRÉPARATION DE L' INOCULUM 

* Ouvrir une ampoule de « Suspension Medium » ou introduire quelques mL d’eau distillée stérile (avec une pipette Pasteur) dans un tube à vis stérile.

* Avec la pipette Pasteur, prélever une seule colonie bien isolée sur milieu gélosé.

* Réaliser une suspension bactérienne en homogénéisant soigneusement les bactéries dans le milieu.

D - INOCULATION DE LA GALERIE API 20 E 

Avec la suspension bactérienne et la pipette ayant servi au prélèvement, remplir tubes et cupules des tests 

CTI

VP

GEL

 

* Remplir uniquement les tubes (et non les cupules) des autres tests.

* Créer une anaérobiose dans les tests ADH, LCD, ODC, URE, H2S en remplissant leur cupule d’huile de paraffine.

* Refermer la boîte d’incubation et la placer dans l’étuve à 35 - 37° C pendant 18 à 24 heures.

E - LECTURE ET DÉTERMINATION 

Elle se fait avec le tableau API 20 E.

(*) BioMérieux : 69280 MARCY-L'ÉTOILE


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