Retour à la page d'accueil  Réalisation d'un frottis sanguin coloré  Retour au menu microbiologie  Retour vers la liste des manipulations

Avec du sang certifié de laboratoire


Date de la dernière modification
: 19-04-2017  

Important : en 1993, une circulaire interdit toute manipulation avec du sang humain dans les lycées et collèges (hormis la section SMS). Ces pages s'adressent donc à cette section, avec les précautions d'usage (sang provenant d'un laboratoire d'analyses biochimiques et médicales, certifié indemne de VIH et d'hépatite).

A) MATÉRIEL  

* Lames dégraissées à l'alcool, lames à bord rodé pour étalement, coffret "Hémacolor" Merck.
* Eau tamponnée à pH = 7,2, un petit bécher, boîtes de Borel pour coloration.
* Échantillon de sang provenant d'un laboratoire.
* Papier absorbant pour enlever les excédents de colorants. 

   

  

B) ÉTALEMENT  

   On dépose une goutte de sang sur la lame dégraissée, à environ 1 cm du bord. L'étalement doit être fait sans tarder. C'est la partie délicate de l'opération et il faut procéder avec le plus grand soin, car la goutte ne doit pas être écrasée, mais étirée. Placer la lame rodée contre la lame dégraissée et la goutte de sang. Attendre 1 à 2 secondes que le sang s'étale sur toute la largeur de la lame rodée. D'un mouvement régulier, glisser la lame rodée vers l'extrémité de la lame dégraissée.

C) SÉCHAGE ET COLORATION  

1. Agiter la lame jusqu'au séchage complet du frottis.

2. Immerger le frottis sanguin 5 fois pendant 1 seconde dans la solution fixatrice (1 seconde dans la solution, 1 seconde dehors etc.) Laisser égoutter et enlever l'excédent avec du papier absorbant, pour ne pas mélanger les colorants.

3. Plonger le frottis 3 fois 1 seconde dans la solution 2 colorante (rose). Laisser égoutter.

4. Plonger le frottis 6 fois 1 seconde dans la solution 3 colorante (bleue). Égoutter.

5. Rincer avec la solution tamponnée à pH = 7,2.

6. Sécher le dessous de la lame avec le papier absorbant.

Retour à la page d'accueil  Retour au menu microbiologie  Retour vers la liste des manipulations